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Come si inserisce un gene in un plasmide?
Come si inserisce un gene in un plasmide?

Video: Come si inserisce un gene in un plasmide?

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Video: BIOTECNOLOGIA e INGEGNERIA GENETICA: il DNA ricombinante e i PLASMIDI 2024, Novembre
Anonim

I passaggi fondamentali sono:

  1. Apri il plasmide e "incolla" nel gene . Questo processo si basa su enzimi di restrizione (che tagliano il DNA) e DNA ligasi (che unisce il DNA).
  2. Inserire il plasmide in batteri.
  3. Cresci molto plasmide -trasportare batteri e usarli come "fabbriche" per produrre la proteina.

Inoltre, come può essere inserito un gene in un plasmide GCSE?

è inserito in un plasmide utilizzando enzimi ligasi. il plasmide va in una cellula batterica. il batterio transgenico si riproduce, risultando in milioni di batteri identici che producono insulina umana.

Inoltre, come si subclona un gene? Passaggi di base per subclonazione Rilasci e purifichi il tuo inserto dal vettore genitore, leghi questo inserto in un vettore di destinazione preparato, trasformi questa reazione di ligazione in cellule batteriche competenti. Quindi si selezionano le celle trasformate per l'inserto.

Tenendo questo in considerazione, quali sono i 4 passaggi della clonazione genica?

Nei classici protocolli di digestione con enzimi di restrizione e clonazione di legatura, la clonazione di qualsiasi frammento di DNA prevede essenzialmente quattro passaggi:

  • isolamento del DNA di interesse (o DNA bersaglio),
  • legatura,
  • trasfezione (o trasformazione), e.
  • una procedura di screening/selezione.

Come si amplifica un plasmide?

Procedura sperimentale

  1. Eseguire la PCR e purificare il prodotto PCR: eseguire la PCR per amplificare il DNA dell'inserto.
  2. Digerire il tuo DNA:
  3. Isolare l'inserto e il vettore mediante purificazione del gel:
  4. Lega il tuo inserto nel tuo vettore:
  5. Trasformazione:
  6. Isolare il plasmide finito:
  7. Verifica il tuo plasmide mediante sequenziamento:

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