Perché un enzima di restrizione non dovrebbe tagliare?
Perché un enzima di restrizione non dovrebbe tagliare?

Video: Perché un enzima di restrizione non dovrebbe tagliare?

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Video: Enzimi di restrizione 2024, Novembre
Anonim

Ci possono essere diversi motivi per cui il tuo l'enzima di restrizione non taglia il DNA come recensito in questo video. La preparazione del DNA da scindere dovrebbe essere privi di contaminanti come fenolo, cloroformio, alcool, EDTA, detergenti o sali eccessivi, che possono interferire con enzima di restrizione attività.

A questo proposito, perché gli enzimi di restrizione non tagliano il DNA batterico?

batteri avere enzimi di restrizione , chiamato anche endonucleasi di restrizione , quale tagliare a doppio filamento DNA in punti specifici in frammenti. interessante, enzimi di restrizione non fendere i propri DNA . batteri prevenire il proprio DNA da abbattere da enzima di restrizione attraverso la metilazione del restrizione siti.

Ci si potrebbe anche chiedere, dove tagliano gli enzimi di restrizione? Enzima di restrizione Tipi in genere, tipo I enzimi tagliati DNA in punti distanti dalla sequenza di riconoscimento; Tipo II tagliare DNA all'interno o vicino alla sequenza di riconoscimento; Tipo III tagliare DNA vicino a sequenze di riconoscimento; e il tipo IV scinde il DNA metilato.

Allo stesso modo, viene chiesto, cosa succede se si aggiunge troppo enzima di restrizione?

Può verificarsi una digestione incompleta quando troppo o pure poco enzima viene utilizzato. Il presenza di contaminanti in il Campione di DNA Potere inibire gli enzimi , con conseguente digestione incompleta. Alcuni enzimi di restrizione richiedono cofattori per la piena attività.

Perché il mio digest di restrizione non funziona?

Incompleto o no digestione a causa dell'attività enzimatica bloccata dalla metilazione del DNA. Se il tuo enzima è attivo e digerisce il controllo del DNA e il la reazione è impostata utilizzando condizioni ottimali, ma si vede ancora problemi insieme a digestione , potrebbe essere perché il l'enzima è inibito dalla metilazione di il DNA modello.

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